Има ли други методи за пречистване на PCR продукти?
Има ли други методи за пречистване на PCR продукти?

Видео: Има ли други методи за пречистване на PCR продукти?

Видео: Има ли други методи за пречистване на PCR продукти?
Видео: ZEITGEIST: MOVING FORWARD | OFFICIAL RELEASE | 2011 2024, Ноември
Anonim

За тези приложения, които изискват PCR почистване или валидиране на PCR резултати, там са две методи обикновено следва: PCR продукт изолиране с помощта на колона и гел пречистване от агарозен гел.

Тук какъв тип хроматография се използва за пречистване на PCR продукти?

За пречистване на PCR продуктите се използва хроматография с изключване по размер. Това улавя малки молекули като протеин, грундове и нуклеотиди, докато големите молекули като PCR продуктите са твърде големи, за да влязат в зърната и да преминат през колоната в събирателните епруветки.

Освен това как пречиствате ДНК? По принцип можете пречиствам Вашият ДНК проби чрез лизиране на вашите клетъчни и/или тъканни проби с помощта на най-подходящата процедура (механично разрушаване, химическо третиране или ензимно смилане), изолиране на нуклеиновите киселини от замърсителите и утаяване в подходящ буферен разтвор.

Освен това защо пречистваме PCR продукт?

Пречистване на ДНК от а PCR реакцията обикновено е необходима за употреба надолу по веригата и улеснява отстраняването на ензими, нуклеотиди, праймери и буферни компоненти. Често използваните методи използват спин колони, съдържащи силициев диоксид, към който ДНК може да бъде селективно свързана в присъствието на хаотропни соли.

Защо трябва да се почиства ДНК?

ние чисти нагоре ДНК от водни разтвори за отстраняване на буферни соли, ензими или други вещества, които биха могли да повлияят на приложенията надолу по веригата. Примерите включват PCR реакция чисти нагоре, чисти нагоре след рестрикционни усвоявания и чисти до геномен или плазмид ДНК замърсени с клетъчни протеини/остатъци.

Препоръчано: