Cre lox обратим ли е?
Cre lox обратим ли е?

Видео: Cre lox обратим ли е?

Видео: Cre lox обратим ли е?
Видео: Cre lox system | Conditional gene knockout using the Cre Lox system | site specific recombination 2024, Ноември
Anonim

Всички рекомбинационни събития, медиирани от FLP или Cre са обратимо . Като има предвид, че изрязването на парче ДНК е съпътствано от loxP /FRT сайтовете се предпочитат пред повторното му въвеждане, инверсия и повторна инверсия се случват с еднаква вероятност. В loxP и FRT целевите сайтове са проектирани, за да се избегне този проблем с повторното обръщане.

Тогава как действа CRE LOX?

Cre - Lox рекомбинацията включва насочването на специфична последователност от ДНК и сплайсирането й с помощта на ензим, наречен Cre рекомбиназа . В Cre протеинът е сайт-специфична ДНК рекомбиназа които могат да катализират рекомбинацията на ДНК между специфични места в ДНК молекула.

Освен това какво прави Cre рекомбиназа? Cre рекомбиназа е тирозин рекомбиназа ензим, получен от P1 бактериофаг. Ензимът (38kDa) е член на семейството на интеграза от специфични за сайта рекомбиназа и то е известно, че катализира специфичното за сайта събитие на рекомбинация между две ДНК места за разпознаване (LoxP сайтове).

Относно това, как тамоксифен индуцира Cre?

Тамоксифен администрация индуцира Cre експресия на рекомбиназа под α-MHC промотора, подобна на тази при горните мишки, което позволява специфично за сърдечно-мускулно изтриване на Dicer в точно определен момент.

Какво представляват сайтовете loxP?

LoxP сайтове са насочени 34 bp последователности, съставени от две 13 bp разпознавания сайтове разделени от 8 bp разделителна област. Последователностите не се срещат естествено в никакви известни геноми, различни от P1 бактериофага, и са достатъчно дълги, че е малко вероятно да се появят случайно.