Съдържание:

Как зареждате гел електрофореза?
Как зареждате гел електрофореза?

Видео: Как зареждате гел електрофореза?

Видео: Как зареждате гел електрофореза?
Видео: креатин киназа : изоферментов и клиническая значение: CK, CK-MB или же CK2 2024, Ноември
Anonim

Зареждане на проби и пускане на агарозен гел:

  1. Добавете Зареждане буфер към всяка от вашите ДНК проби.
  2. След като се втвърди, поставете агарозата гел в гел кутия ( електрофореза мерна единица).
  3. Напълнете гел кутия с 1xTAE (или TBE) до гел е покрит.
  4. Внимателно натоварване стълба с молекулно тегло в първата лента на гел .

Във връзка с това, колко ДНК трябва да заредите за гел електрофореза?

Размерът на ДНК за зареждане на ямка е променлива. Най-малкото количество от ДНК която може да бъде открита с етидум бромид е 10 ng. ДНК количества до 100 ng на ямка ще доведат до остра, чиста лента върху оцветен с етидиев бромид гел.

Освен това, защо се използва буфер при гел електрофореза вместо вода? В буфер е необходимо за поддържане на рН на разтвора на ДНК близо до неутралното ниво, защото ако може да стане кисел чрез електролиза. Електрическите токове, причинени от електродите, могат да причинят вода молекули за дисоцииране и освобождаване на Н+ йони.

Хората също така питат, защо се използва маркер в гел електрофореза?

По-малките фрагменти се движат по-бързо и следователно по-далеч от по-големите фрагменти, докато се пробиват през змия гел . Защо се използва маркер при преминаване на фрагментите през гел ? А маркер съдържа ДНК фрагменти с известен размер. Маркери се изпълняват във всеки гел за сравнение с неизвестните фрагменти в др гел платна.

Колко ДНК може да се види на агарозен гел?

Повечето агарозни гелове се правят между 0,7% и 2%. 0,7% гел ще показват добро разделяне (резолюция) на големи ДНК фрагменти (5–10 kb) и 2% гел ще показват добра разделителна способност за малки фрагменти (0,2–1 kb).

Препоръчано: