Как намирате концентрацията на ДНК от абсорбцията?

2024 Автор: Miles Stephen | [email protected]. Последно модифициран: 2023-12-15 23:33

Концентрация на ДНК се оценява чрез измерване на абсорбция при 260 nm, регулирайки A₂₆₀ измерване на мътност (измерено от абсорбция при 320 nm), умножавайки се по коефициента на разреждане и използвайки връзката, че A₂₆₀ от 1.0 = 50 ug/ml чиста dsDNA.

По същия начин хората питат как намирате концентрацията на ДНК?

За да определите концентрацията на ДНК в оригиналната проба, направете следното изчисление:

1. Концентрация на dsDNA = 50 μg/mL × OD₂₆₀ × фактор на разреждане.
2. Концентрация на dsDNA = 50 μg/mL × 0,65 × 50.
3. Концентрация на dsDNA = 1,63 mg/mL.

Също така, какво е добра концентрация на ДНК? А добре качество ДНК пробата трябва да има A₂₆₀/А₂₈₀ съотношение 1,7-2,0 и A₂₆₀/А₂₃₀ съотношение по-голямо от 1,5, но тъй като чувствителността на различните техники към тези замърсители варира, тези стойности трябва да се приемат само като ръководство за чистотата на вашата проба.

По този начин ДНК абсорбира ли при 280 nm?

Съотношението на абсорбция при 260 nm срещу 280 nm е обикновено се използва за оценка ДНК замърсяване на протеинови разтвори, тъй като протеините (по-специално ароматните аминокиселини) абсорбира светлина при 280 nm.

Как използвате NanoDrop за концентрация на ДНК?

По принцип на нанокапка ви дава възможност да изберете ДНК , РНК, протеини. Трябва да изберете ДНК , след това поставете 2 ΜL вода (за предпочитане мили Q) изберете „Blank“след това поставете още 2 ΜL вода, за да потвърдите, че мярката е 0. След това поставете 2 ΜL от вашата проба. Ще получите измерването.