Защо спектрофотометърът трябва да бъде настроен на определена дължина на вълната?
Защо спектрофотометърът трябва да бъде настроен на определена дължина на вълната?

Видео: Защо спектрофотометърът трябва да бъде настроен на определена дължина на вълната?

Видео: Защо спектрофотометърът трябва да бъде настроен на определена дължина на вълната?
Видео: How To Reprogram Your DNA 2024, Ноември
Anonim

Когато регулирате дължина на вълната на спектрофотометър , Вие са промяна на позицията на призмата или дифракционната решетка, така че различна дължини на вълните на светлина са насочени към процепа. Колкото по-малка е ширината на процепа, толкова по-добра е способността на инструмента да разделя различни съединения.

Следователно, на каква дължина на вълната ще бъде настроен спектрофотометърът?

В зависимост от обхвата на дължината на вълната на източника на светлина, той може да бъде класифициран в два различни типа: UV-видим спектрофотометър: използва светлина в ултравиолетовия диапазон (185 - 400 nm) и видимия диапазон (400 - 700 nm ) от спектъра на електромагнитното излъчване.

По същия начин защо трябва да калибрирате спектрометъра всеки път, когато променяте дължината на вълната? Спектрофотометър трябва да бъде калибриран срещу празен разтвор т.н че измерванията след него могат да използват абсорбцията на празния разтвор като нулева еталонна. Мярка за способността на веществото да абсорбира светлина от определена стойност дължина на вълната.

при каква дължина на вълната трябва да се вземат показанията?

Предприеме показания на интервали от 5 nm малко преди и след това дължина на вълната . Например, ако максималната абсорбция е намерена при 450 nm, тогава за да получите по-точна четене от λmax, вземете абсорбцията показания при 440, 445, 455 и 460 nm.

Защо измервате абсорбцията на разтвора при 550 nm?

Протеините реагират с медни йони в алкална среда решение за образуване на комплекс с виолетов цвят, който поглъща светлина при 550 nm . Следователно, от измерване концентрацията на комплекса, като се използва A550 ( Абсорбция в 550 nm ), Вие са също измерване концентрацията на протеин.

Препоръчано: